کروماتوگرافی مایع با عملکرد بالا یا کروماتوگرافی مایع فشار بالا (HPLC) یک روش کروماتوگرافی است که بریا جداسازی مخلوطی از ترکیبات در شیمی تجزیه و بیوشیمی برای شناسایی، تعیین مقدار یا خالص سازی اجزای یک ترکیب استفاده می شود. 

کروماتوگرافی مایع با عملکرد بالا در اصل شکل بهبودیافته کروماتوگرافی ستونی است. به جای عبور از میان ستون تحت تاثیر نیروی گرانش، در این روش یال تحت فشارهای بالا تا 400 اتمسفر هدایت می شود. به همین دلیل این روش سریع تر است و به شما اجازه می دهد از یک اندازه بسیار کوچک تر برای مواد ستون استفاده کنید. در این صورت سطح جانبی بسیاری زیادی بین فاز ساکن و مولکول هایی که از بین آن عبور می کنند ایجاد می شود.